ELISA試劑盒實(shí)驗做了很多次，可是結果還是有偏差？可能很多同學(xué)都會(huì )出現這樣的問(wèn)題，那么問(wèn)題到底出在哪呢，今天小編就來(lái)給大家總結一下，ELISA試劑盒實(shí)驗中會(huì )經(jīng)常遇見(jiàn)的問(wèn)題。
一、ELISA試劑盒簡(jiǎn)介
酶聯(lián)免疫吸附測定是在免疫酶技術(shù)的基礎上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測定技術(shù)。
二、ELISA試劑盒的應用
1.免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2.研究抗酶抗體的合成。
3.顯現微量的免疫沉淀反應。
4.定量檢測體液中抗原或抗體成份。
三、ELISA試劑盒實(shí)驗疑難問(wèn)題解答
1.非正常的樣本值
①不正確的收集或保存
解決方案：確保正確的底物體積混合。如果底物是凍干粉，用相應緩沖液重懸*，充分混合并在一定時(shí)間內使用。
②不正確的樣本制備
說(shuō)明書(shū)中樣本制備方法已經(jīng)過(guò)性能測試驗證，嚴格按照說(shuō)明書(shū)推薦進(jìn)行。確保使用正確的校正稀釋液。
2.信號強度增長(cháng)不充分
①底物準備有誤
解決方案：確保正確的底物體積并混合。如果底物是凍干粉，用相應緩沖液重懸，充分混合并在一定時(shí)間內使用。
②每孔底物添加體積有誤
解決方案：保證移液器正常工作，必要時(shí)進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
③孵育時(shí)間或溫度有誤
解決方案：嚴格按照推薦的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行實(shí)驗，避免在環(huán)境條件變化的位置孵育96孔板（如放在通風(fēng)處或窗臺邊）。
④偶聯(lián)物或底物準備有誤
解決方案：確?；旌舷嗤w積的偶聯(lián)物和底物。加入后會(huì )立即顯色。底物在使用前應避光保存。
⑤儀器設置不正確
解決方案：確保酶標儀使用了正確的濾光片，確保按照說(shuō)明書(shū)，正確的配置儀器參數。
3.邊緣效應
①工作臺溫度不均衡
解決方案：避免在環(huán)境條件變化的位置孵育，如放在通風(fēng)處或窗臺邊。
②體系液體蒸發(fā)
解決方案：保證移液器正常工作，必要時(shí)進(jìn)行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
③疊板孵育時(shí)避免疊板。
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更新時(shí)間：2023-04-03 
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