ELISA試劑盒實(shí)驗靈敏度高的原因

ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個(gè)環(huán)節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個(gè)環(huán)節常出現問(wèn)題的原因及解決辦法總結于下，以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

ELISA試劑盒試驗操作中可能影響結果的原因及解決辦法分析：

1 選擇試劑

選擇質(zhì)量?jì)?yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

2 加樣可能原因：

1）血清或血漿標本分離不好即進(jìn)行加樣；

2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(cháng)(特別是室內溫度較高時(shí))；

3）加完標本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。

ELISA試劑盒解決辦法：

1） 標本為血清：最好將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。

2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。

3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，最好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

5) 標本較多時(shí)，請分批操作。

3 孵育可能原因：

1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗che底；

2) 孵育時(shí)間人為延長(cháng)，導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?，難以清洗che底。