人半乳糖凝集素9（Galectin-9）ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

在使用人半乳糖凝集素9（Galectin-9）ELISA檢測試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時，以下是一些重要的注意事項(xiàng)：

試劑盒組成與保存：試劑盒通常包含預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板、酶標(biāo)抗體工作液、標(biāo)本稀釋液、濃縮洗滌液、標(biāo)準(zhǔn)品、底物工作液、第一抗體工作液和終止液等。這些組分通常需要在2-8℃的溫度下保存123。

樣本收集與處理：收集血清、血漿（如EDTA、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等樣本，并盡早檢測。若不能立即檢測，應(yīng)在2-8℃保存48小時，更長時間則需冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清或血漿樣本在測定前應(yīng)至少進(jìn)行1:50稀釋1。

實(shí)驗(yàn)操作：實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心法。簡而言之，將樣本和生物素標(biāo)記抗體加入酶標(biāo)板孔中進(jìn)行反應(yīng)，隨后進(jìn)行洗滌，加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)，最后用底物TMB顯色，通過測量OD值來確定Galectin-9的濃度2。

檢測范圍與靈敏度：不同的試劑盒可能有不同的檢測范圍和靈敏度。例如，一些試劑盒的檢測范圍是78.12-5000pg/mL，靈敏度為28.55pg/mL3。

實(shí)驗(yàn)器材：需要使用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格的酶標(biāo)儀、自動洗板機(jī)、恒溫箱、系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭等實(shí)驗(yàn)器材2。

注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)操作條件的差異（如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)等）可能導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值有所差異。因此，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件建立標(biāo)準(zhǔn)曲線3。

請務(wù)必遵循具體試劑盒的使用說明書，并嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。