大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒

大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒

ELISA檢測概述：

ELISA（酶聯(lián)接免疫吸附反應分析）是以免疫學(xué)反應為基礎，將抗原、抗ti的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗技術(shù)。 由于抗原、抗ti的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。

實(shí)際應用中，通過(guò)不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗ti的間接法、用于檢測抗原的雙抗ti夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶(hù)提供比較常用的ELISA雙抗ti夾心法及ELISA間接法服務(wù)

特點(diǎn)概述

1.專(zhuān)一性強?？乖c抗ti的免疫反應是專(zhuān)一反應， 而免疫酶技術(shù)以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗ti)，使用的抗ti除標記了酶以外，與普通抗ti的免疫反應特性并無(wú)多大差別。

2.靈敏度高。由于抗ti聯(lián)結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗ti的結合，大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。

3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。

4.結果易觀(guān)察。對檢測結果即可用肉眼觀(guān)察,又可用顯微鏡觀(guān)察,也可以用分光光度計進(jìn)行比色測定,還可用顯微鏡觀(guān)察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。

5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定,依據光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。

6.可以大規模測定樣品。如有成千.上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內完成。

7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō)，不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性?xún)x器與試劑，普通實(shí)驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置

ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法：

1）血清-----操作過(guò)程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。

試劑盒的儲存及有效期：

未開(kāi)封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。

使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，開(kāi)封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

穩定性：

經(jīng)測定，試劑盒在有效期內按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。

大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒

ELISA試劑盒操作注意事項：

1）試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄，不可保存。

2）實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6）洗滌酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7）底物A應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。

8）加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。

9）按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

[說(shuō) 明]

1.由于現有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量 技術(shù)風(fēng)險。

2.最終的實(shí)驗結果與試劑的有效性、實(shí)驗者的相關(guān)操作以及 當時(shí)的實(shí)驗環(huán)境密切相關(guān)，請務(wù)必準備充足的標本備份。

3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì )有少許差別，如:檢測限、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請依據試劑盒內說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗操作，網(wǎng)站電子版說(shuō)明書(shū)僅作參考。

4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實(shí)驗說(shuō)明才會(huì )得到最jia的檢測結果。

5.本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。

6.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會(huì )由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導致ELISA實(shí)驗結果偏差。

7.若樣本為細胞培養上清，因該類(lèi)樣本干擾因素較多，如:細胞狀態(tài)、細胞數量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測不出的情況。

8.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗ti及捕獲抗ti不匹配，而不被檢測出。

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