ELISA試劑盒實(shí)踐過(guò)程中的一些技巧

ELISA試劑盒實(shí)驗看似簡(jiǎn)單，其實(shí)不然。記得以前一個(gè)同學(xué)*次做ELISA實(shí)驗，跟我說(shuō)，ELISA實(shí)驗簡(jiǎn)直太簡(jiǎn)單了，到第2次在次做ELISA實(shí)驗的時(shí)候，他驚訝了，說(shuō)結果差別怎么這么大（同一份標本），第三次的時(shí)候，他決定認真的做一次，爭取做到同一份標本，這次讓他感受到ELISA并不是那么簡(jiǎn)單，發(fā)覺(jué)其實(shí)挺難的。今天的文章中為大家講述一些ELISA實(shí)驗中的小技巧，希望對大家有所幫助！

1.操作前應對實(shí)驗的物理參數有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數等，要先查看水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。

2.正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺，血清殘留在反應孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說(shuō)明書(shū)一致，否則可導致結果錯誤，實(shí)驗重復性差。

3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗滌次數不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)推薦的洗滌次數，洗液在反應孑L內滯留的時(shí)間不宜太長(cháng)。不要使洗液在孑L間竄流，造成孔問(wèn)污染，導致假陰性或假陽(yáng)性。

4.要保證加液量一致ELISA試劑盒我們在使用時(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準，造成顯色不統一，判斷錯誤。

5.顯色液量不可過(guò)多加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色系統后要避光反應，顯色液量不能過(guò)多，以免顯色過(guò)強。

ELISA試劑盒的影響因素應選用有國家批準文號，質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品，不能圖便宜，忽視質(zhì)量保證。試劑應妥善保存于4℃冰箱內，在使用時(shí)先平衡至室溫，不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開(kāi)啟后要在一周內用完，剩余的試劑下次用時(shí)應先檢查是否變質(zhì)，顯色劑如被污染變色將造成全部顯色，導致錯誤結果。